మైఖేల్ J పావెల్
ద్రవ బయాప్సీ మరియు FFPE నమూనాలలో కణితి జన్యు పరివర్తన మరియు ఇతర ముఖ్యమైన జన్యు ఉత్పరివర్తనాల కోసం సున్నితత్వ అవసరాలను పరిష్కరించడానికి డయాకార్టాలోని శాస్త్రవేత్తలు వినూత్నమైన జెనోన్యూక్లిక్ యాసిడ్ మాలిక్యులర్ క్లాంప్ టెక్నాలజీ లేదా XNA సాంకేతికతను అభివృద్ధి చేశారు. XNA సాంకేతికత వాట్సన్-క్రిక్ బేస్ జత చేయడం ద్వారా ఆసక్తి యొక్క లక్ష్య DNA శ్రేణులను హైబ్రిడైజ్ చేసే మోడిఫైడ్ బ్యాక్బోన్లతో యాజమాన్య రూపొందించిన XNA ఒలిగోమర్లను ఉపయోగిస్తుంది. సీక్వెన్స్ పూర్తి మ్యాచ్ అయినప్పుడు, XNAలు DNA లక్ష్య శ్రేణులకు గట్టిగా హైబ్రిడైజ్ అవుతాయి, PCR ప్రతిచర్యలో DNA పాలిమరేస్ ద్వారా స్ట్రాండ్ పొడిగింపును అడ్డుకుంటుంది. అయినప్పటికీ, లక్ష్య శ్రేణిలో మ్యుటేషన్ ఉన్నప్పుడు, అసమతుల్యత XNA ఒలిగోమర్:DNA డ్యూప్లెక్స్ యొక్క అస్థిరతకు దారితీస్తుంది, DNA పాలిమరేస్ ద్వారా స్ట్రాండ్ పొడిగింపును అనుమతిస్తుంది. ఫలితంగా, ఉత్పరివర్తనలు కలిగిన లక్ష్య శ్రేణి మాత్రమే యాంప్లిఫికేషన్ కోసం ఎంపిక చేయబడుతుంది మరియు వైల్డ్-టైప్ సీక్వెన్స్, చాలా పెద్ద DNA మొత్తాలు/కాపీలలో ఉన్నప్పటికీ, విస్తరించబడదు. XNA ఒలిగోమర్లు DNA పాలిమరేస్లచే గుర్తించబడనందున, అవి తదుపరి నిజ-సమయ PCR ప్రతిచర్యలలో ప్రైమర్లుగా పనిచేయవు. లిక్విడ్ బయాప్సీ లేదా ట్యూమర్ టిష్యూ బయాప్సీ (FFPE) నమూనాల నుండి పొందిన న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను ఉపయోగించి XNA మాలిక్యులర్ క్లాంప్ల పరీక్షలు చాలా సున్నితంగా ఉంటాయి. 5 ng ctDNAలో గుర్తించే పరిమితి (LOD) 0.5% (మ్యుటాంట్ DNA యొక్క 7 లేదా 8 కాపీలు) కంటే తక్కువగా ఉంటుంది, ఇది రోగి నుండి దాదాపు 2 ml రక్తానికి సమానం. అధిక స్థాయి సర్క్యులేటింగ్ సెల్ ఫ్రీ మ్యూటాంట్ ట్యూమర్ DNA (ctDNA) మరియు ఎక్సోసోమ్ డెరైవ్డ్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్లు కొలొరెక్టల్ మరియు ఇతర క్యాన్సర్లలో పేలవమైన మనుగడతో సంబంధం కలిగి ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది మరియు స్థాయిని డైనమిక్ మానిటరింగ్ క్యాన్సర్కు అంచనా కారకంగా ఉపయోగించవచ్చు. చికిత్స..