జర్నల్ ఆఫ్ ఫార్మసీ అండ్ ఫార్మాస్యూటికల్ రీసెర్చ్ అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

రక్త క్యాన్సర్ చికిత్స కోసం మెరుగైన బయోఫార్మాస్యూటికల్‌ను అందించడానికి కొత్త L-ఆస్పరాగినేస్ యొక్క బయోప్రోస్పెక్టింగ్ మరియు హేతుబద్ధమైన ఇంజనీరింగ్

టేల్స్ ఎ కోస్టా-సిల్వా, IM కోస్టా, GS అగామెజ్-మోంటల్వో, ఎ పెస్సోవా మరియు జి మోంటెరో

పరిచయం : బాక్టీరియా ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన L-ఆస్పరాగినేస్ (EC3.5.1.1) తీవ్రమైన లింఫోసైటిక్ లుకేమియా (ALL) చికిత్సలో ఉపయోగించబడుతుంది. అయినప్పటికీ, అన్ని చికిత్స సమయంలో బ్యాక్టీరియా L-ASNase వాడకం ద్వారా అసంఖ్యాక దుష్ప్రభావాలు నమోదు చేయబడ్డాయి. ప్రొకార్యోటిక్ L-ఆస్పరాగినేస్ చికిత్సకు సంబంధించిన ఇతర లోపాలు హైపర్సెన్సిటివిటీ ప్రతిచర్యలు, తక్కువ ఉష్ణ స్థిరత్వం, మానవ ప్రోటీసెస్ క్షీణత మరియు వేగవంతమైన క్లియరెన్స్.

లక్ష్యాలు : బయో ప్రాస్పెక్టింగ్ యూకారియోటిక్ మూలాధారాలు లేదా సైట్-డైరెక్ట్ మ్యూటాజెనిసిస్ ద్వారా వాణిజ్య బాక్టీరియల్ ఎల్-ఆస్పరాగినేస్‌ను సవరించడం వంటి ఈ ప్రతికూలతలను అధిగమించడానికి కొన్ని పద్ధతులు ఉపయోగించబడ్డాయి. L-ASNase యొక్క యూకారియోటిక్ మూలాలను కనుగొనడానికి, ఈ అధ్యయనంలో 20 ఫిలమెంటస్ శిలీంధ్రాలు ఉపయోగించబడ్డాయి, ఇవి జెల్లీ ఫిష్ ఒలిండియాస్ సాంబాక్వియెన్సిస్ యొక్క మైక్రోబయోమ్ నుండి వేరుచేయబడ్డాయి.

ఫలితాలు : జెల్లీ ఫిష్ టెంటకిల్స్ నుండి వేరుచేయబడిన ఆరు శిలీంధ్రాల నమూనాలు (టాక్సిన్ ఉత్పత్తికి బాధ్యత వహించే జెల్లీ ఫిష్‌లోని గోధుమ నిర్మాణాలు) మునిగిపోయిన కిణ్వ ప్రక్రియ ద్వారా L-ఆస్పరాగినేస్ ఉత్పత్తిని చూపించాయి. స్ట్రెయిన్ OS02 ద్వారా అత్యధిక కార్యాచరణ 2.7 U/gతో చూపబడింది. ప్రతిస్పందన ఉపరితల పద్దతి యొక్క కేంద్ర మిశ్రమ రూపకల్పన ద్వారా L-ఆస్పరాగినేస్ ఉత్పత్తిని ఆప్టిమైజేషన్ చేయడానికి ఈ జాతి ఎంపిక చేయబడింది. గరిష్ట ఎంజైమ్ ఉత్పత్తి (11.45 U/g) కోసం, ఉత్తమ స్థితిని మార్చారు Czapek Dox మీడియం L-ఆస్పరాజైన్‌తో అనుబంధంగా మరియు 32.5 � C మరియు 190 rpm వద్ద pH 7.4కి సర్దుబాటు చేయబడింది.

తీర్మానాలు : కమర్షియల్ బాక్టీరియల్ L-ఆస్పరాగినేస్ యొక్క ప్రోటీన్ ఇంజనీరింగ్‌కు సంబంధించి మేము L-ఆస్పరాగినేస్ ప్రోటీజ్-రెసిస్టెన్స్‌ని పొందేందుకు సైట్-డైరెక్ట్ మ్యూటాజెనిసిస్‌ను ఉపయోగించాము: కొత్త ఎస్చెరిచియా కోలి L-ఆస్పరాగినేస్ (EcAII) వేరియంట్, ట్రిపుల్ మ్యూటాంట్. ప్రాథమిక ఫలితాలు E. coli BL21 (DE3)లో ఉత్పరివర్తన చెందిన ఎంజైమ్ వ్యక్తీకరించబడిందని మరియు అసలు L-ఆస్పరాగినేస్ కార్యాచరణను సంరక్షించిందని చూపించింది. ఈ L-ఆస్పరాగినేస్ ప్రోటీయో ఫారమ్‌లు ప్రత్యామ్నాయ బయోఫార్మాస్యూటికల్స్‌గా ఉండవచ్చు, ఇవి అన్ని చికిత్సలలో ఫలితాన్ని మరింత మెరుగుపరుస్తాయి.