జన్యువులు మరియు ప్రోటీన్లలో పరిశోధన అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

MyoDకి యాంటీబాడీ మయోజెనిన్ ఆర్గానిక్ దృగ్విషయాన్ని తగ్గిస్తుంది మరియు అగ్రిన్-ప్రేరిత న్యూరోట్రాన్స్మిటర్ రిసెప్టర్ క్లంప్

 ఎరికా ఇ ఆండర్సన్1, డేవిడ్ హెచ్ కాంప్‌బెల్2, కెల్లీ ఎజెల్1, పాల్ ఆర్ స్టాండ్లీ2 మరియు వేడ్ ఎ గ్రో1

మయోజెనిక్ నిర్బంధ కారకాల కుటుంబం, అలాగే MyoD మరియు మయోజెనిన్, మయోజెనిసిస్ మరియు కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్ ఏర్పడటానికి మార్గనిర్దేశం చేస్తాయి. Myogenin సేంద్రీయ దృగ్విషయం MyoD చేత సక్రియం చేయబడుతుంది మరియు కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్ వద్ద న్యూరోట్రాన్స్మిటర్ రిసెప్టర్ (AChR) యొక్క సేంద్రీయ దృగ్విషయాన్ని సక్రియం చేయడం మయోజెనిన్ యొక్క అన్ని విధుల్లో ఒకటి. అభివృద్ధిలో మస్క్యులస్ ఫైబర్‌లకు దగ్గరగా ఉన్నందున మోటారు న్యూరాన్‌లు అగ్రిన్‌ను విడుదల చేస్తాయి, ఇది కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్ ఏర్పడే స్థానానికి ఇప్పటికే ఉన్న AChRల సమూహాన్ని నడిపిస్తుంది. మయోడి లేదా మయోజెనిన్‌కు ప్రోటీన్‌కి నిరంతరం బహిర్గతం కావడం వలన C2C12 మస్క్యులస్ సెల్ కల్చర్‌లో అగ్రిన్-ప్రేరిత AChR క్లంప్ తగ్గుతుందని మేము పూర్వం వివాదాస్పదంగా ఉన్నాము. MyoD మరియు myogenin అభివృద్ధిలో కదులుతున్నప్పటికీ చాలా ప్రత్యేకంగా స్థాపించడమే మా లక్ష్యం. పద్ధతులు: C2C12 సెల్ కల్చర్‌లు ప్రయోగాత్మక అవకతవకలతో పాటు MyoD మరియు మైయోజెనిన్ మరియు మయోజెనిన్ మోర్ఫోలినోలకు ప్రతిరోధకాలను బహిర్గతం చేశాయి. ఎండో-పోర్టర్ ప్రయోగాత్మక మానిప్యులేషన్‌ల సెల్ టేక్‌ను మెరుగుపరచడానికి ఇష్టపడదు. అగ్రిన్-ప్రేరిత AChR క్లంప్‌పై ప్రోటీన్ లేదా మోర్ఫోలినో ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి AChR క్లంప్ పరీక్షలు జరిగాయి. ప్రోటీన్ లేదా మోర్ఫోలినో ఎక్స్పోజర్ అయినప్పుడు వెస్ట్రన్ బ్లాట్స్ మయోజెనిన్ ఆర్గానిక్ దృగ్విషయాన్ని యాక్సెస్ చేస్తాయి. ఫలితాలు: మయోజెనిన్‌కు ప్రోటీన్‌ను ఎనిమిది గంటల కంటే తక్కువ సమయంలో బహిర్గతం చేయడం వల్ల మయోట్యూబ్‌లలో అగ్రిన్-ప్రేరిత AChR క్లంప్ తగ్గుతుందని ఇక్కడ ఫలితాలు చూపిస్తున్నాయి. కొన్ని ప్రయోగాత్మక మానిప్యులేషన్‌లు మయోజెనిన్ ఆర్గానిక్ దృగ్విషయాన్ని ఏకకాలంలో తగ్గించడంతో పాటు అగ్రిన్‌డ్యూస్డ్ ఎసిహెచ్‌ఆర్ క్లంప్‌లో తగ్గుదలని స్కేల్ చేయడాన్ని మేము ముందుగా వివాదాస్పదంగా పొందాము. ఈ ఫలితాలు నిర్దిష్టంగా అయితే MyoD మరియు మయోజెనిన్ కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్ నిర్మాణంలో కదులుతాయి. ముగింపు: మయోజెనిన్ ఆర్గానిక్ దృగ్విషయాన్ని సక్రియం చేసే మెకానిజం ద్వారా అగ్రిన్-ప్రేరిత AChR క్లంప్‌కు MyoD కీలకమని ఈ ఫలితాలు సలహా ఇస్తున్నాయి, దీని ఫలితంగా AChR ఆర్గానిక్ దృగ్విషయం సక్రియం అవుతుంది, నర్సింగ్‌లోని అసోసియేట్ చివరికి AChrin-ప్రేరిత AChR కోసం వర్తించే స్థాయిని ఉత్పత్తి చేస్తుంది. గుత్తి మరియు కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్ నిర్మాణం. టెట్రామిథైల్ రోడమైన్ (మాలిక్యులర్ ప్రోబ్స్)తో సంయోగం చేయబడిన α-బంగారోటాక్సిన్ బైండింగ్ ద్వారా AChRలు లేబుల్ చేయబడ్డాయి. DMలో డెబ్బై రెండు గంటలు ఉన్నప్పుడు AChRలను లేబుల్ చేయడానికి 37 ° C వద్ద అరగంట పాటు టాక్సిన్-కలిగిన మాధ్యమంలో సంస్కృతులు పొదిగేవి. కౌల్ స్లిప్‌లను టెంపరేచర్ ఫాస్ఫేట్ బఫర్డ్ సెలైన్ (PBS)తో మూడుసార్లు కడిగి, PBSలో ఒక జత పారాఫార్మల్డిహైడ్‌తో పది నిమిషాల పాటు మౌంట్ చేసి, PBSతో మూడుసార్లు కడిగి, కోల్డ్ వుడ్ ఆల్కహాల్‌లో -20°C వద్ద ఐదు నిమిషాలు డీహైడ్రేట్ చేసి, మాగ్నిఫైయర్ స్లయిడ్‌లపై అమర్చారు. కనిపించే కాంతి కోసం వెక్టాషీల్డ్ మౌంటింగ్ మీడియంలో (వెక్టర్ లాబొరేటరీస్). AChR క్లస్టర్‌లు అసోసియేట్ ఇన్ నర్సింగ్ IX70 ఒలింబోస్ ఇన్‌వర్టెడ్ మాగ్నిఫైయర్‌తో 20X ఆబ్జెక్టివ్ (200X యొక్క పూర్తి మాగ్నిఫికేషన్‌ను ఇస్తాయి), అసోసియేట్ ఇన్ నర్సింగ్‌డ్ ఫ్లోరోసెంట్ చిత్రాలు మాగ్నఫైర్ డిజిటల్ ఇమేజింగ్ ప్యాకేజీతో హై-రిజల్యూషన్ JPG ఫైల్‌లుగా క్యాప్చర్ చేయబడ్డాయి.ఫ్లోరోసెంట్ చిత్రాలలో మయోట్యూబ్‌ల యొక్క అన్ని అంశాలపై ACHRల యొక్క ప్రకాశవంతమైన సమూహాలు కనుగొనబడ్డాయి. ప్రతి గ్రేస్కేల్ చిత్రం తప్పుగా వ్యవహరించిన సెల్ ప్రొఫైలర్ యొక్క ఆబ్జెక్ట్ ఐడెంటిఫికేషన్ ఫార్ములా విశ్లేషించబడింది. ఫార్ములాలో ఉపయోగించిన అంచు వివరించబడింది, ఎందుకంటే పెల్ చూపించాల్సిన కనీస ఫ్లోరోసెంట్ తీవ్రతను క్లస్టర్‌లో భాగంగా లెక్కించాలి. ఎడ్జ్‌తో చేసిన ప్రయోగం రహస్యంగా దాచుకోని డెబ్బైవ వంతు యొక్క కనిష్ట ప్రకాశం క్లస్టర్‌లో భాగంగా లెక్కించడానికి తగినంత కనిపించే కాంతిని కలిగి ఉంటుంది మరియు ఈ థ్రెషోల్డ్ అన్ని విశ్లేషణలకు ఉపయోగించబడింది. ధ్వని తీర్పు మరియు స్థిరమైన పరిమాణాన్ని నిర్ధారించడానికి, అంచు మరియు ప్రతి ప్రత్యామ్నాయ సెట్టింగ్‌లు అన్ని జట్లు మరియు చిత్రాలలో పగలని స్థిరంగా ఉంటాయి. మయోజెనిసిస్ అంతటా సీక్వెన్స్ యాక్టివేషన్ యొక్క నమూనాలు, MyoD ద్వారా మయోజెనిన్ యాక్టివేషన్‌తో ప్రారంభించి జన్యువులు వరుసగా ఆన్ అవుతాయని అంచనా వేస్తున్నాయి. మయోజెనిక్ డిఫరెన్సియేషన్ కంబైన్డ్ జీనోమ్-వైడ్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ ఇష్యూ బైండింగ్ మరియు ఎక్స్‌ప్రెషన్ ఐడెంటిఫికేషన్ కోసం అసోసియేట్ ఇన్ నర్సింగ్ ప్రారంభ బ్లూప్రింట్ క్లాస్ మస్క్యులస్ సెల్స్‌లోని మయోజెనిక్ డిఫరెన్సియేషన్ ప్రోగ్రామ్‌ను ఎక్కువగా వివరించడానికి. మయోజెనిక్ నిర్బంధ కారకాలు మయోజెనిసిస్‌తో పాటు కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్ యొక్క అసెంబ్లీని డైరెక్ట్ చేస్తాయి. ప్రత్యేకించి, పెరుగుతున్న మైయోబ్లాస్ట్‌లలో MyoD జంక్షన్ స్పెసిఫికేషన్ మరియు కాంట్రాక్టర్‌కు సంబంధించిన జన్యువులను లక్ష్యంగా చేసుకున్న ప్రారంభ బ్లూప్రింట్ వివాదాస్పదమైనది.
కీవర్డ్లు: ACHR; అగ్రిన్, C2C12; క్రమం వ్యక్తీకరణ; MyoD; మైయోజెనిన్; కాంట్రాక్టర్ జంక్షన్.