అమెరికన్ జర్నల్ ఆఫ్ డ్రగ్ డెలివరీ అండ్ థెరప్యూటిక్స్ అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

అధునాతన క్రోమాటోగ్రఫీ 2020: ష్రిమ్ప్ ఎంజైమాటిక్ జలవిశ్లేషణ నుండి యాంటీ ఆక్సిడెంట్ పెప్టైడ్స్ యొక్క శుద్ధీకరణ మరియు క్యారెక్టరైజేషన్ - Xueqin Liu-Jiangsu Ocean University

Xueqin లియు

పరిచయం:

మెకానికల్ తయారీ నుండి పొందిన పెనాయస్ కెరతురస్ యొక్క రొయ్యల తల, బిజినెస్ ట్రిప్సిన్ (0.1%) ద్వారా హైడ్రోలైజ్ చేయబడింది. సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ద్వారా వెనుకబడిన సమ్మేళనం (95°C) వేడి నిష్క్రియం చేయడం ద్వారా జలవిశ్లేషణ ప్రతిస్పందన ముగిసింది. ప్రోటీన్ కంటెంట్, సంపూర్ణ ఉచిత అమైనో ఆమ్లాలు (FAA), అనూహ్యమైన ముఖ్యమైన నైట్రోజన్ (TVB-N) మరియు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ SDS-PAGE ప్రొఫైల్ కోసం బయోకెమికల్ పరిశోధన ద్వారా సృష్టించబడిన ప్రోటీన్ హైడ్రోలైసేట్‌లు చిత్రీకరించబడ్డాయి. ప్రయోజనకరమైన లక్షణాలు, ఉదాహరణకు, ఎమల్సిఫైయింగ్ పరిమితి, కొవ్వు శోషణ మరియు నురుగు లక్షణాలు మూల్యాంకనం చేయబడ్డాయి. క్రూడ్ ష్రిమ్ప్ హెడ్ ప్రొటీన్‌తో విరుద్ధంగా, ఎంజైమాటిక్ జలవిశ్లేషణ ఫలితాలు ప్రోటీన్ పదార్ధం మరియు FAA (17.22%)లో గణనీయమైన పెరుగుదలను (p <0.05) ప్రదర్శించాయి. ఈ పరీక్షలో ఉపయోగించిన ట్రిప్సిన్ యొక్క తక్కువ స్థాయి సబ్‌స్ట్రేట్‌ను కరిగించడానికి సరిపోతుంది, ఇది గణనీయమైన ప్రోటీన్ పదార్ధం మరియు TVB-N స్థాయిలను (<6mg/100g) తీసుకువస్తుంది, ఇది సముద్ర వస్తువుల కోసం నిర్మించబడిన దానికంటే చాలా తక్కువగా ఉంటుంది.

ష్రిమ్ప్ స్క్వాండర్ అనేది అస్టాక్శాంతిన్ యొక్క ముఖ్యమైన బావి, ఇది ప్రోటీన్‌లతో సముదాయంగా జరుగుతుంది మరియు కెరోటినాయిడ్‌లు క్యాన్సర్ నివారణ ఏజెంట్ కదలికను కలిగి ఉన్నట్లు తెలిసినట్లే ప్రొటీన్ ఒంటరిగా ఉంటుంది. క్యాన్సర్ నివారణ ఏజెంట్ యాక్షన్ రిచ్ ప్రొటీన్ పరిమితులను పొందేందుకు బ్యాక్టీరియా ప్రోటీజ్‌ని ఉపయోగించి రొయ్యల స్క్వాండర్ యొక్క జలవిశ్లేషణను అప్‌గ్రేడ్ చేయడానికి పరీక్షలు పూర్తయ్యాయి. కెరోటినాయిడ్ పునరుద్ధరణ, ప్రొటీన్ కంటెంట్, ట్రైక్లోరో యాసిడిక్ కారోసివ్ (TCA) కరిగిపోయే పెప్టైడ్ పదార్ధం మరియు డిఫెనైల్ పిక్రిల్ హైడ్రాజైల్ క్లోరైడ్ (DPPH) శోధన కదలికపై వృధా, పొదుగుతున్న ఉష్ణోగ్రత మరియు సమయం కోసం నిర్దిష్ట ఉత్ప్రేరకం స్థిరీకరణగా ఉండే మూడు ప్రక్రియ కారకాల ప్రభావం పాక్షికంగా ప్రణాళికాబద్ధంగా ఉపయోగించి అంచనా వేయబడింది. . షెల్ఫిష్‌ను నిర్వహించడం, ఉదాహరణకు, రొయ్యలు మొత్తం రొయ్యల బరువులో దాదాపు 35-45% వరకు భారీ మొత్తంలో బలమైన వ్యర్థాలను సృష్టిస్తాయి. ఇవి కిరీటం ఆభరణాలను త్వరగా వృధా చేస్తాయి, ఈ విధంగా సహజ సమస్యలను కలిగిస్తాయి. ఇంకా, రొయ్యల స్కాండర్ ప్రొటీన్, చిటిన్, కెరోటినాయిడ్ మరియు ఉత్ప్రేరకాల యొక్క గొప్ప మూలం కాబట్టి, ఈ ముఖ్యమైన భాగాలను ఆకర్షణీయమైన వస్తువులుగా తిరిగి పొందేందుకు ఆకట్టుకునే ప్రీమియం ఆలస్యంగా ప్రదర్శించబడింది.

Astaxanthin is the significant carotenoid present in scavanger squander, and happens as carotenoprotein buildings, where carotenoids are bound to proteins. Complexing of carotenoids to protein brings about presentation of different hues in shellfish and gives soundness to carotenoids, which are in any case entirely insecure. Endeavors have been made to recuperate carotenoids from shrimp squander either as carotenoids or as carotenprotein complex. Studies have been done on recuperation of carotenoids and carotenoproteins from shellfish squander. Carotenoids from shrimp squander have been recuperated utilizing dissolvable extraction and oil extraction and its security under various stockpiling conditions has been accounted for. Enzymatic hydrolysis of shrimp squander was found to improve the oil extractability of carotenoids. Carotenoproteins from shrimp waste can be confined by enzymatic and maturation methods. Chelating operators like EDTA and the proteolytic compound trypsin has been utilized to recuperate carotenoprotein from shrimp squander. Trypsin hydrolysis of snow crab squander followed by ammonium sulfate precipitation yielded carotenoprotein with expanded carotenoid content. Sea life organic cancer prevention agent peptides have become a hotpots in multidisciplinary research, for example, current biomedicine. Hydrolysis of shrimp squander with proteases was found to upgrade the carotenoid recuperation. Carotenoids happen as a complex with protein in scavangers and proteases upset the protein-carotenoid bond, along these lines expanding the carotenoid recuperation. Protease treatment for long time upgraded carotenoid recuperation when the objective is to recoup carotenoid either by oil or dissolvable extraction. Be that as it may, if the objective is to separate carotenoprotein, extraordinary hydrolysis may totally disturb this security bringing about lower carotenoid content in the protein detach. Accordingly controlled hydrolysis of shrimp squander with proteases with lower catalyst level at lower temperature will help in acquiring the protein disconnect wealthy in carotenoid content. Shrimp squander is a significant wellspring of astaxanthin, which happen as a complex with proteins, and protein confines just as carotenoids are known to have cell reinforcement movement. Examinations were done to streamline hydrolysis of shrimp squander utilizing a bacterial protease to get cell reinforcement movement rich protein segregate. The impact of three procedure factors in particular chemical fixation to squander, brooding temperature and time on carotenoid recuperation, protein content, trichloro acidic corrosive (TCA) solvent peptide substance and DiPhenyl Picryl Hydrazylchloride (DPPH) rummaging movement was assessed utilizing a partially factorial structure. A high connection coefficient (>0.90) between the watched and the anticipated qualities showed the fittingness of the plan utilized. Most extreme carotenoid recuperation was gotten by hydrolysing the shrimp squander with 0.3 % chemical for 4 h. DPPH radical rummaging action of carotenoprotein confine was especially influenced by protein focus, temperature and time of hydrolysis. The examination showed that so as to acquire the carotenoprotein from shrimp squander with higher carotenoid content hydrolysing with a catalyst grouping of 0.2–0.4 %, at lower temperature of 25–30° upto 4 h is perfect. Be that as it may, so as to get the protein disengage with expanded cancer prevention agent movement hydrolysing at higher temperature of 50 °C, with higher catalyst convergence of 0.5 % for shorter length is increasingly perfect.

పద్ధతి:

తల మరియు కారపేస్‌తో కూడిన పెనియస్ ఇండికస్ నుండి ష్రిమ్ప్ స్క్వాండర్ సమీపంలోని మార్కెట్ నుండి సేకరించబడింది మరియు చల్లగా ఉన్న స్థితిలో పరిశోధనా కేంద్రానికి తరలించబడింది. మెటీరియల్ ఉపయోగం ముందు టేబుల్ టాప్ వర్టికల్ షేపర్ (రోబో-కూపే)లో సజాతీయంగా మార్చబడింది. M/s Genencor నుండి ఆల్కలేస్ అనే బ్యాక్టీరియా ప్రోటీజ్ జలవిశ్లేషణ కోసం ఉపయోగించబడింది. ఈ పరిశోధనలో, రొయ్యల జిగురు యొక్క లైయోఫైలైజ్డ్ పౌడర్ ముడి పదార్థంగా ఉపయోగించబడింది మరియు రొయ్యల జిగురు ముడి పదార్థం నుండి విడదీయబడిన ప్రోటీజ్-క్రియేటింగ్ స్ట్రెయిన్ ద్వారా పంపిణీ చేయబడిన ప్రోటీజ్ హైడ్రోలైజ్ చేయబడింది.

ఫలితాలు:

10 గ్రా రొయ్యల పొడిని 50 mL శుద్ధి చేసిన నీటిలో విభజించారు మరియు 1M HCl ఉపయోగించి అమరిక యొక్క pH 6.0కి అలవాటు పడింది. ఆ సమయంలో, ST-1 ప్రొటీజ్ సబ్‌స్ట్రేట్‌కు ఉత్ప్రేరకం యొక్క నిష్పత్తిలో చేర్చబడింది. మిశ్రమం వణుకుతో 50 â„ÂÆ' వద్ద బ్రూడ్ చేయబడింది. 6 h పొదిగిన తర్వాత, ST-1ప్రోటీజ్‌ను నిష్క్రియం చేయడానికి మిశ్రమం 15 నిమిషాలకు 100 â„ÂÆ' వద్ద వేడెక్కింది. మద్యం అవపాతం: ఈ అమరికను 40 â„ÂÆ'కి చల్లబరిచారు మరియు నీటిని బయటకు పంపడానికి రోటా-వానిష్ చేయబడింది. అన్‌హైడ్రస్ ఇథనాల్ అప్పుడు చేర్చబడింది మరియు 12 గంటలతో ఏర్పాటు చేయబడింది. ఈ అమరిక 15 నిమిషాలకు 8000 ఆర్‌పిఎమ్ వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడింది మరియు రొయ్యల జిగురు పెప్టైడ్‌లను (ఎస్‌పిలు) పొందేందుకు సూపర్‌నాటెంట్‌ను వాక్యూమ్‌లో ఎండబెట్టారు, తర్వాత దానిని జెల్ విభాగం G-25 ద్వారా వేరు చేసి ప్రక్షాళన చేశారు.

ముగింపు:

కణ ఉపబల చర్య పరీక్ష యొక్క అనంతర ప్రభావాలు మూడవ భాగంలో అధిక క్యాన్సర్ నివారణ ఏజెంట్ చర్యను ప్రదర్శించినట్లు సూచించింది; నాలుగు విభాగాలను పొందేందుకు హై స్టేజ్ ఫ్లూయిడ్ స్టేజ్ (RP-HPLC) చుట్టూ తిరగడం ద్వారా సెగ్మెంట్ మూడు సేకరించబడింది మరియు వేరుచేయబడింది. పరిమిత క్యాన్సర్ నివారణ ఏజెంట్ పెప్టైడ్ అధిక DPPH రమ్మింగ్ చర్యను చూపుతుంది, సాధారణంగా గొప్ప హైడ్రాక్సైడ్ రాడికల్ మరియు సూపర్ ఆక్సైడ్ అయాన్ శోధన కదలిక. సెల్ రీన్‌ఫోర్స్‌మెంట్ పెప్టైడ్‌లు క్లినికల్, కరెక్టివ్, రిస్టోరేటివ్ మరియు ఫుడ్ అప్లికేషన్‌లలో మెరుగుదల కోసం విస్తృతమైన అవకాశాలను కలిగి ఉన్నాయి.